Page 243 - Resúmen - XXV Congreso Latinoamericano de Parasitología - FLAP

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Optimización de un protocolo para la detección de Toxoplasma gondii por

qPCR a partir de muestras de sangre periférica en pacientes VIH/SIDA

Diestra C. A, Camones H. J, Apaza A. C., Flores B. C., Ramal C., Faustino M.,

Calderón M, y Grupo de Investigación Toxoplasma en Perú.

Calderón, Maritza; Diestra, Andrea

UPCH

INTRODUCCIÓN: La Toxoplasmosis es una enfermedad zoonótica causada por Toxoplasma gondii. La
distribución del parásito es amplia, considerado un parásito oportunista en pacientes con VIH/ SIDA.
Alrededor de un tercio de pacientes con VIH presentan complicaciones nerviosas de considerable
morbilidad. Optimizar el protocolo de PCR en tiempo real (qPCR) para la detección de T.gondii,
determinando el tipo de muestra que permita detectar las concentraciones más bajas de parásito en sangre
periférica. Método: Se elaboraron curvas de calibración en muestras de sangre periférica (ST: Sangre
Total, GEB: Sangre con Guanidina 6M, CLOT: coágulo sanguíneo) infectando cada una con taquizoitos
de T.gondii (RH) concentración de 105 par/ml, se obtuvo el ADN y se hizo diluciones seriadas de 1:10 para
construir los puntos de las curvas hasta obtener 1 eq-par/ml. Se determinó la sensibilidad de cada tipo de
muestra mediante qPCR. Fueron evaluadas GEB y CLOT para 10 pacientes VIH con síndromes
neurológicos y 5 donantes sanos. Resultados: El qPCR en CLOT detectó la carga parásita más baja (1
eq-par/ml) en todas sus repeticiones. Por el contrario, el qPCR en ST y GEB mostró una sensibilidad de
hasta 10 eq-par/ml para ambos. Al procesar las muestras provenientes de los pacientes, el 30% (3/10)
resultó positivo para T.gondii mediante qPCR, de los cuales 3 muestras: IQ-007 (Cq: 35.18 ± 0.21), IQ-012
(Cq: 34.83 ± 0.18) e IQ-023 (Cq: 32.59 ± 0.33) fueron captados utilizando tipo de muestra CLOT y el 10%
(1/10): IQ-023 (Cq: 30.5 ± 0.51) fue captado utilizando tipo de muestra GEB. Los donantes sanos resultaron
negativos. Conclusiones: Las muestras de CLOT producen una mejor sensibilidad para la qPCR en
comparación con la ST y GEB, lo que permitió la detección de T.gondii en mayor número de muestras,
haciendo al CLOT muestra recomendada para detección de T,gondii a partir de sangre periférica.

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RESÚMENES DE CARTELES