Page 244 - Resúmen - XXV Congreso Latinoamericano de Parasitología - FLAP
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                  Determinación de variaciones genéticas en Toxoplasma gondii aisladas a

                 partir de muestras de líquido cefalorraquídeo de pacientes con VIH/SIDA



               Apaza A. C., Cordero A., Diestra C. A, Flores B. A., Huertas E., Faustino M., Ramal C.,
               Calderón M., y Grupo de Investigación Toxoplasma en Perú

               UPCH/lid


               Introducción:  Toxoplasma  gondii, ocasiona  una  elevada  morbilidad  y  mortalidad  en  pacientes
               inmunocomprometidos, siendo la toxoplasmosis encefálica una de las complicaciones en pacientes con
               síntomas neurológicos. La técnica del RFLP permite determinar el genotipo de T. gondii y por ende la
               virulencia  de  las  cepas,  por  medio  de  endonucleasas  de  restricción,  existiendo  tres  genotipos
               predominantes, denominados tipos I, II y III. La correlación entre la sintomatología con la identificación del
               genotipo del parásito, aportará mayor información para un tratamiento específico de Toxoplasmosis. Se
               determinó  las  variaciones genéticas  de T. gondii por  Nested  PCR  del  locus  SAG2  y  RFLP  a  partir  de
               muestras de Líquido cefalorraquídeo (LCR) de pacientes con VIH/SIDA. Métodos: Muestras de LCR de
               20 pacientes VIH positivos, fueron evaluadas por qPCR para el gen REP529, las muestras positivas se
               analizaron en el locus SAG2 por Nested PCR, luego el amplicon fue digerido por las enzimas HhaI que
               determina el genotipo II y Sau3AI, el genotipo III, mediante RFLP. Como controles utilizamos las cepas
               de T. gondii RH (Tipo I), ME49 (Tipo II) y VEG (Tipo III). Resultados: El 60 % (12/20) de pacientes fueron
               positivos a T. gondii por qPCR, el 33 % (4/12) presentó un rango entre 25 a 27 de ciclo de cuantificación
               (Cq) representando una carga parasitaria de aproximadamente 103 parásitos/ml, los cuales amplificaron
               el locus SAG2 por Nested PCR, finalmente se obtuvo por digestión enzimática y electroforesis 2 muestras
               que  presentaron  amplicones  con  un  tamaño  de  221  pb  (HhaI)  y  2  muestras  con  241  pb  (Sau3AI)
               determinando los genotipos Tipo I y III. Conclusiones: Se identificaron los genotipos clonales I y III de T.
               gondii en muestras de LCR de pacientes con VIH. Este estudio presenta un soporte informativo al momento
               de generar un adecuado tratamiento, siendo uno de los primeros estudios realizados en Perú.
































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