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Afiches Enfermedades Emergentes y Zoonóticas de Panamá

A­13 NUEVA TÉCNICA MOLECULAR PARA DETECTAR
EL GEN NSP4 DEL VIRUS CHIKUNGUNYA

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L Sáenz , M Chen­Germán , B Henríquez , D Araúz , Y Díaz , B Moreno A , A
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Valderrama , F Samudio , S López­Vergès 1
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A­13 1 Instituto Conmemorativo Gorgas de Estudios de la Salud, Panamá.
El virus Chikungunya (CHIKV) es un Alfavirus, familia Togaviridae; que se
detectó por primera vez en Panamá en mayo 2014 y circuló al mismo tiempo
que el virus del Dengue (DENV) que es endémico a nuestro país. Ambos virus
causan síntomas similares por lo tanto, la confirmación por laboratorio es crucial
para identificar el agente causal y cualquier nueva introducción. Al momento de
la introducción de CHIKV en Panamá, nos percatamos que las RT­PCR en
tiempo real según los protocolos del CDC no lograban detectar todos los casos
positivos. Por lo cual, se decidió realizar la detección de CHIKV por la RT­PCR
genérica del género Alfavirus (CHIKV, virus de la Encefalitis Equina Venezolana,
virus Madariaga, virus Mayaro, etc.) en tiempo final complementando con la
secuenciación de los fragmentos amplificados. Esta técnica es sensible, sin
embargo toma tiempo y es más costosa, por lo tanto no es viable para un
programa de vigilancia a largo plazo. Es importante implementar herramientas
moleculares específicas y sensibles capaces de detectar una carga viral baja.
Desarrollamos un ensayo RT­PCR en tiempo real basado en la amplificación
específica del gen de polimerasa de ARN de CHIKV (NSP4), analizando todos
los genomas completos de CHIKV descritos en América disponibles en el
GenBank. Además, hemos construido un vector que contiene el gen nsp4 de
CHIKV para poder cuantificar el mínimo de copias que pueda detectar esta
nueva técnica y comparar su sensibilidad con relación a las anteriores.
Esperemos que esta técnica pueda detectar una copia de genoma viral
mostrando alta sensibilidad, lo que ayudaría a la detección de este virus en
pocas cantidades tanto en muestras de pacientes como en mosquitos vectores.

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