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Afiches Enfermedades Emergentes y Zoonóticas de Panamá

A­37 USO DEL GEN CITOCROMO B (CYT B) PARA LA
DETERMINACIÓN DE ESPECIES EN AISLADOS DE
LEISHMANIA (VIANNIA), EN LA REPÚBLICA DE
PANAMÁ.

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A­37 M Dávila , A Saldaña , V Pineda , F Samudio 1
1 Instituto Conmemorativo Gorgas de Estudios de la Salud, Universidad de
2
Panamá, Maestría en Microbiología Ambiental

La leishmaniasis tegumentaria es una zoonosis causada por el protozoo
flagelado del género Leishmania, cuyo vector es un díptero hematófago del
género Lutzomyia en el continente americano. En Panamá esta parasitosis
alcanza una prevalencia estimada de 930 a 3000 nuevos casos anuales, lo que
la convierte en un problema de salud pública. El desarrollo de técnicas
moleculares para determinación de especie ha sido necesario debido a que los
estadios de este parásito son morfológicamente indistinguibles entre especies.
La determinación de especies es esencial para un tratamiento específico y hacer
un pronóstico adecuado de la enfermedad. L. panamensis es el principal agente
etiológico de Leishmaniasis en nuestro país, aunque se han reportado con
menor frecuencia otras especies del subgénero Viannia. El gen del Citocromo b
(Cytb), que se encuentra en el maxicírculo del cinetoplasto ha demostrado
eficiencia para el análisis filogenético y la determinación de especies de
Leishmania del Viejo y Nuevo Mundo. Por tratarse de un gen mitocondrial
codificante para una subunidad enzimática que media la cadena respiratoria,
esté cuenta con una región no editada de aproximadamente (1087 bp). La cual
varía entre diferentes especies del mismo subgénero, lo que le hace útil para la
discriminación de especies; sin embargo, no se ha evaluado su potencial para
discriminar y encontrar variación en la estructura poblacional de las especies del
subgénero Viannia. Para este ensayo se efectuó un análisis in silico, mediante el
cual se analizó por medio de la plataforma bioinformática Ugene las secuencias
del subgénero Viannia disponibles en el GenBank con (1078 bp); se pudo
constatar que un fragmento de aproximadamente (900 bp) posee regiones bien
conservadas y regiones con suficiente variación para discriminar entre especies.
Se diseñó una estrategia de PCR convencional utilizando iniciadores específicos
para dicha región, se amplificaron y secuenciaron un total de 100 aislados de
Leishmania procedente de la región Este y Oeste del país. Los resultados
preliminares con el 77% de las cepas, indican que el segmento del (Cytb)
empleado en este estudio es capaz de discriminar las diferentes especies del
subgénero Viannia, se logró identificar L. braziliensis y L. guyanensis en menor
frecuencia, además de inferir variación de la estructura poblacional de aislados
locales de L. panamensis.

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