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Afiches Enfermedades Emergentes y Zoonóticas de Panamá

A­27 PERFIL DE 16S MITOCONDRIAL DE
RHIPICEPHALUS SANGUINEUS S.L. (ACARI:ICODIDAE)
VINCULADO A UN CASO FATAL EN EL
CORREGIMIENTO DE DON BOSCO, PANAMÁ

A­27 J Martínez­Mandiche , L Dominguez , C González , B Moreno ,
1
3
1
2
S Bermúdez , A Martínez 1
2
1 Departamento de Genómica y Proteómica, Departamento de Investigación en
2
Entomología Médica, Departamento de Virología, Instituto Conmemorativo
3
Gorgas de Estudios de la Salud
El complejo Rhipicephalus sanguineus tiene una distribución cosmopolita, que
se extiende sobre diferentes continentes, con énfasis en países de elevada
humedad. Es una especie de considerable importancia para la salud pública
debido a que transmiten varios tipos de patógenos a perros y humanos. El
objetivo del estudio fue la determinación del patógeno causante de una muerte
en el corregimiento de Don Bosco en abril del 2017, y luego analizar el perfil
microbiano en Rhipicephalus sanguineus usando metodología de
secuenciamiento de última generación. Los datos fueron obtenidos en el lugar
de residencia del caso analizado. Evaluamos garrapatas adultas ubicadas en
paredes, ventanas, y cortinas del hogar. Los adultos se identificaron siguiendo el
criterio taxonómico de Fairchild et al. 1966. El ADN fue extraído individualmente
por garrapata. Las muestras fueron esterilizadas con etanol grado molecular y
lavado en solución PBS al 1x. Posteriormente, fueron extraídas por un método
de purificación en columnas siguiendo el protocolo del fabricante (QIagen) para
tejido. Se realizaron 3 PCRs, una para detección de 16s mitocondrial, detección
de genes OmpA de bacterias patogenicas y gltA de Rickettsia spp. Las muestras
positivas a 16s seguidamente fueron secuenciadas con MiSeq V3 de Illumina y
analizadas usando Basespace. Se analizaron 50 garrapatas, en todas se obtuvo
un fragmento para 16S. La secuenciación proporcionó >10 millones de lecturas
para la clasificación a nivel de reino hasta especie de las muestras analizadas.
Excluyendo las copias no clasificadas, en el rango de clasificación por género,
los 3 géneros abundantes fueron Coxiella 82.3% (n=7492971), Rickettsia 11.0%
(n=10004821) y Staphylococcus 3.1% (n=282146). Al nivel de especie,
Rickettsia massiliae 31.9% (n=374881), Rickettsia aeschilimannii 19.2%
(n=226438) y Coexiella burnetii 17.9% (n=210259). 16 otras especies
clasificadas al nivel de género fueron detectadas. Estos análisis evidencian la
circulación de diversas bacterias potencialmente patogénicas en las muestras
analizadas. El alto porcentaje de organismos tipo­coxiella y Coxiella burneitti en
las lecturas indican la necesidad de tomar a esta bacteria en cuenta en casos de
enfermedad relacionada en humanos susceptible.

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