Page 212 - Resúmen - XXV Congreso Latinoamericano de Parasitología - FLAP

S1-25

Hacia la descripción proteómica de la maquinaria de procesamiento del

RNA ribosomal en Leishmania major

Nepomuceno-Mejía, Tomás ; Pineda-García, Isabel ; Aguirre-González, Sagrario ;
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1
1
Florencio-Martínez, LuisE ; Martínez-Calvillo, Santiago
1
1
1 Facultad de Estudios Superiores Iztacala/UNAM; Facultad de Estudios Superiores Iztacla/UNAM
2

En el nucléolo se lleva a cabo la síntesis, la maduración y el ensamblaje de las dos subunidades
ribosomales. El precursor del RNA ribosomal (rRNA) experimenta una serie de modificaciones químicas y
cortes nucleolíticos orquestados por familias de RNAs nucleolares pequeños en asociación con un set
particular de proteínas, entre las que destacan Nop56, Fibrilarina y Cbf5. Tenemos interés en la biología
básica del nucléolo del protozoo patógeno del humano Leishmania major, especialmente en la descripción
de factores proteicos involucrados en el proceso de formación de las especies maduras de rRNA. El
análisis in silicodel genoma de L. major indicó la presencia de ortólogos para Nop56 (LmNop56), Fibrilarina
(LmFib) y Cbf5 (LmCbf5). Además, estas proteínas presentan los dominios estructurales y el arreglo
tridimensional analógo al descrito en otros organismos. Los tres genes fueron amplificados por PCR,
clonados en el vector pGEM-T easy y subclonados en el plásmido pB6-PTP. Las construcciones
plasmídicas fueron verificadas por secuenciación. Obtuvimos la línea celular: L. major Nop56-PTP
(LmNop56-PTP). La caracterización de estas células transgénicas se realizó por ensayos de tipo Western
blot e inmunofluorescencia indirecta. La proteína recombinante LmNop56-PTP se expresa como una
molécula con una masa molecular de ~73kDa. Durante el transcurso normal del ciclo celular, LmNop56-
PTP co-localiza con la proteína LmNop56 endógena; en interfase se agrupan en el nucléolo y durante
mitosis LmNop56-PTP se segrega a los núcleos hijos por un mecanismo similar al empleado por la proteína
endógena. La generación de las líneas LmFib-PTP y LmCbf5-PTP así como la descripción de las proteínas
asociadas a estas tres proteínas están siendo abordadas. Financiamiento por CONACyT (256561) y por
PAPIIT (IA204019).

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RESÚMENES DE CARTELES