Page 214 - Resúmen - XXV Congreso Latinoamericano de Parasitología - FLAP

S1-27

Transcripción de la RNA polimerasa III en Leishmania major

Florencio-Martínez, Luis E. ; Román-Carraro, Fiordaliso C. ; Mondragón-Rosas, Fabiola ;
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Cano-Santiago, Andrés ; Barocio-Rodríguez, Luis A. ; Hernández-Zamarripa, Aldo R. ;
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Villa-Delavequia, Gino S. ; Romero-Chaveste, Adrián J. ; Ortega-Ortiz, Roberto C. ;
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Nepomuceno-Mejía, Tomás ; Manning-Cela, Rebeca ; Martínez-Calvillo, Santiago
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1 Universidad Nacional Autónoma de México, Facultad de estudios Superiores Iztacala/Unidad de
Biomedicina; Universidad Nacional Autónoma de México, Facultad de Estudios Superiores Iztacala/
2
Unidad de Biomedicina; CINVESTAV-IPN/Departamento de Biomedicina Molecular
3

Los parásitos del género Leishmania presentan mecanismos de expresión genética atípicos. Nuestro
grupo está interesado en el estudio de la transcripción de la RNA polimerasa III (Pol III), encargada de
sintetizar RNAs que realizan funciones esenciales en la célula, como los tRNAs y el 5S rRNA. TFIIIB, factor
indispensable para el inicio de la transcripción de Pol III, está compuesto por 3 subunidades: Bdp1, Brf1 y
TBP. En el genoma de L. major identificamos ortólogos de Bdp1 (LmBdp1) y Brf1 (LmBrf1), los cuales
presentan los dominios característicos. Ensayos de inmunofluorescencia mostraron que tanto LmBdp1
como LmBrf1 se localizan en el núcleo. Para demostrar la participación de LmBrf1 en la transcripción de
Pol III, se intentó obtener mutantes nulas mediante recombinación homóloga. Se logró generar una
línea knock-out sencillo en la que se reemplazó una copia alélica de LmBrf1 por el gen de resistencia a
higromicina. Sin embargo, no fue posible la eliminación de la segunda copia alélica, lo que sugiere
fuertemente que LmBrf1 es un gen esencial para la viabilidad de promastigotes de L. major. Experimentos
ChIP demostraron la unión de LmBrf1 a genes de tRNA, 5S rRNA y snRNAs. De manera inesperada, estos
experimentos sugirieron la unión de LmBrf1 al promotor del rRNA. Además, ensayos de purificación por
afinidad en tándem demostraron que LmBrf1 se une a TBP, la tercera subunidad de TFIIIB. Experimentos
similares llevados a cabo con la subunidad C82 de Pol III y con el represor transcripcional Maf1 condujeron
a la identificación de otros probables factores de transcripción de Pol III en los tripanosomátidos.
Financiamiento: donativos 251831 (CONACyT) e IN207118 (PAPIIT).

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RESÚMENES DE CARTELES