Page 300 - Resúmen - XXV Congreso Latinoamericano de Parasitología - FLAP

S2-42

Evaluación de la actividad deacetilasa del candidato a sirtuina

GL50803_1 6569 (GdSir2.3) de Giardia duodenalis.

Suárez Jurado, Aravy; Ramírez Hernández, María Helena

Laboratorio de Investigaciones Básicas en Bioquímica - LIBBIQ. Facultad de Ciencias. Universidad
Nacional de Colombia

Giardia duodenalis es un protozoario de gran interés médico al ser el agente causal de la giardiasis,
enfermedad gastrointestinal de alta incidencia a nivel mundial para la cual no se cuenta aún con una
vacuna o un tratamiento eficiente. En aras de buscar nuevos blancos farmacológicos contra este parásito
se ha abordado el estudio de enzimas de su metabolismo energético como las sirtuinas, deacetilasas
dependientes del dinucleótido de adenina y nicotinamida (NAD), estructuralmente conservadas en todos
los dominios de la vida. Estas proteínas están encargadas de la regulación de diferentes procesos
celulares como el silenciamiento génico, la progresión del ciclo celular y la evasión del sistema inmune en
otros parásitos protozoarios. Previamente, en el Laboratorio de Investigaciones Básicas en Bioquímica –
LIBBIQ UN se han estudiado las sirtuinas de G. duodenalis identificándose a la GdSir2.1 como una
deacetilasa dependiente de NAD. Este trabajo tuvo como objetivo principal identificar bioinformática y
experimentalmente un nuevo candidato a sirtuina en G. duodenalis, mediante la producción de la proteína
recombinante 6xHis – GdSir2.3 en el sistema heterólogo E. coli. Las condiciones de expresión fueron
estandarizadas, la proteína recombinante se purificó empleando cromatografía de afinidad y fue evaluada
mediante ensayos enzimáticos de deacetilación in vitro empleando un sustrato fluorogénico. Con lo
anterior se encontró que la secuencia del candidato presenta características típicas de la familia sirtuina
como un motivo de cisteínas hacia la región media de la proteína, donde se ubicaría el dominio catalítico
de la misma. En cuanto a la recombinante, se purificó una proteína del tamaño esperado (46kDa) la cual
presentó actividad deacetilasa in vitro dependiente de NAD indicando que efectivamente el candidato
corresponde a una proteína de la familia sirtuina.

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RESÚMENES DE CARTELES